动物ELISA试剂盒操作步骤如下

 　　动物ELISA试剂盒是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。以这些特点在上得到了广泛的应用，由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。广泛用于定量检测各种分子，包括细胞因子，趋化因子，生长因子和蛋白酶等。
　　
　　动物ELISA试剂盒操作步骤如下：
　　一、样品准备：
　　1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
　　2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释（如2μl血清加入198μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。
　　3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
　　
　　二、检验方法：
　　1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
　　2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
　　3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
　　4.混匀，置37℃反应30分钟。
　　5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
　　6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
　　7.洗涤，同步骤5。
　　8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
　　9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。