兔血清总补体elisa试剂盒操作步骤
更新时间:2023-06-07 浏览次数:690
兔血清总补体ELISA试剂盒是常用于研究免疫系统的一种实验技术,它是一种准确、可靠、灵敏的实验技术,在临床和科研领域得到了广泛应用。
一、原理
ELISA是一种基于抗原-抗体反应的检测技术,其中酶标记的二级抗体或亲和素与分子之间形成复合物,通过底物酶反应生成荧光或吸光度信号。兔血清总补体ELISA试剂盒利用双抗原夹心法检测血清样品中总补体含量。具体来说,首先将血清样品加入含有植物血凝素的96孔板孔中固定;然后加入生物素标记的补体C3抗体,与未被固定的补体C3结合;最后加入辣根过氧化物酶标记的蛋白A,与生物素结合的抗体形成复合体。洗涤后加入底物TMB,产生蓝色反应产物,加入停止剂停止反应,测定OD值,OD值与样品中总补体含量呈正相关关系。
二、操作步骤
1、取出所需试剂和材料,标记试板。
2、加入样品和对照物质。
3、加入生物素补体C3抗体(第一抗体)。
4、洗涤板子去除所有未结合的第一抗体。
5、加入辣根过氧化物酶标记的蛋白A(第二抗体)。
6、洗涤板子去除所有未结合的第二抗体。
7、加入底物TMB。
8、停止反应,并测定吸光度值。
三、兔血清总补体ELISA试剂盒具有以下优点:
1、灵敏度高,可以检测到极低浓度的总补体。
2、准确性高,结果稳定可靠。
3、操作简单,易于实验室进行。
四、应用领域
兔血清总补体ELISA试剂盒广泛应用于临床医学、生命科学和免疫学等领域。其中,最常见的应用是检测患者血清中总补体含量,以诊断某些自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和其他结缔组织病等。此外,该试剂盒还可以用于研究小鼠模型中的免疫反应,评估药物对免疫系统的影响等方面。