小鼠c-fosELISA试剂盒 实验材料与试剂配制:
试剂
(1) 包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液):
Na2CO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸馏水至1000ml
(2) 洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸馏水至1000ml
(3) 稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。
(4) 终止液(3M H2SO4):
蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):
0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml
0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml。
(6) TMB(四甲基联苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml
底物缓冲液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
(7) ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物缓冲液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
(8) 抗原、抗体和酶标记抗体。
(9) 正常人血清和阳性对照血清。
c-fosELISA试剂盒是一种可以检测c-fos蛋白表达的试剂盒。c-fos是一种即早基因,当细胞遇到外界刺激时会被激活。因此,检测c-fos的表达可以帮助研究人员理解细胞对外界刺激的反应机制。
它是基于酶联免疫吸附法(ELISA)原理制备的试剂盒。采用双抗体夹心法,将抗c-fos的单克隆抗体涂在微孔板上,加入标准品、阳性对照物和样本,与抗c-fos的酶标记单克隆抗体发生反应,形成抗原抗体复合物。加入底物后,样品中的c-fos被酶标记单抗检测,通过测量底物酶的发色反应强度,可以确定样品中c-fos的含量。
优点是:检测灵敏度高,标准曲线的线性范围宽,重复性好,可以同时处理多个样品。
c-fosELISA试剂盒在研究中的应用非常广泛。以下是几个应用实例。
1.神经科学
从神经学角度来看,用于确定细胞在响应感觉、学习和记忆、社交互动等方面的c-fos蛋白表达。
2.脉络丛上皮细胞的研究
也可以用于分析脉络丛上皮细胞在细胞增生、分化和神经元的凋亡中扮演的角色。这对于研究中枢神经系统和眼球的生长发育及疾病有重要意义。
3.癌症研究
癌症的转移和侵袭是癌症治疗之前的关键问题。可以用于研究这些问题。检测肿瘤细胞中c-fos的表达,可以确定其与癌症转移、侵袭和耐药性的关系。
c-fosELISA试剂盒的应用在生物学研究中具有重要意义。它可以帮助研究人员更好地了解生物体在响应刺激时的反应机制,以及不同发育阶段和疾病状态细胞的表现。此外,它可以为研究新药物和治疗方法提供数据支持,有助于找到治疗和预防疾病的新颖途径。